Guía paso a paso para preparar gel de agarosa para electroforesis

¿Tiene alguna dificultad para preparar gel de agarosa?Dejar seguimiento connuestro técnico de laboratorio en la preparación del gel.

El proceso de preparación del gel de agarosa consta de los siguientes pasos:

Pesaje de polvo de agarosa

Pese la cantidad requerida de polvo de agarosa según la concentración deseada para su experimento. Las concentraciones de agarosa comunes oscilan entre el 0,5% y el 3%. Se utilizan concentraciones más altas para separar moléculas de ADN más pequeñas, mientras que concentraciones más bajas son para moléculas más grandes.

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Preparación de la solución tampón

Agregue el polvo de agarosa a un tampón de electroforesis apropiado, como 1 × TAE o 1 × TBE. El volumen de tampón debe coincidir con el volumen de gel necesario para su experimento.

Disolver la agarosa

Calentar la mezcla de agarosa y tampón hasta que la agarosa se disuelva por completo. Esto se puede hacer usando un microondas o un plato caliente. Revuelva la solución de forma intermitente para evitar que se desborde. La solución de agarosa debe volverse transparente sin partículas visibles.

Enfriar la solución de agarosa

Deje que la solución de agarosa calentada se enfríe a unos 50-60 °C. Agite la solución durante el proceso de enfriamiento para evitar una solidificación prematura.

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Agregar tinte de ácido nucleico (opcional)

Si desea visualizar ADN o ARN en el gel, puede agregar una tinción de ácido nucleico, como GelRed o bromuro de etidio, en esta etapa. Al manipular estas manchas, use guantes y tenga cuidado, ya que pueden ser tóxicas.

Lanzar el gel

Vierta la solución de agarosa enfriada en un molde de gel de electroforesis preparado. Inserte un peine para crear pocillos de muestra, asegurándose de que el peine esté seguro y que la solución se distribuya uniformemente en el molde.

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 Solidificación del gel

Deje que el gel se solidifique a temperatura ambiente, lo que normalmente demora entre 20 y 30 minutos, según la concentración y el espesor del gel.

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Rquitando el peine

Una vez que el gel se haya solidificado por completo, retire con cuidado el peine para revelar los pocillos de muestra. Coloque el gel junto con el molde en la cámara de electroforesis y cúbralo con la cantidad adecuada de tampón de electroforesis, asegurándose de que el gel esté completamente sumergido.

Preparación para la electroforesis

Una vez que el gel esté listo, cargue sus muestras en los pocillos y continúe con el experimento de electroforesis..

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Hora de publicación: 15 de octubre de 2024