Membrana de acetato de celulosa de preprocesamiento
Membrana de corte:
Corte la membrana de acetato de celulosa en tamaños específicos según la cantidad de muestras separadas, normalmente 2,5 cm x 11 cm o 7,8 cm x 15 cm.
Línea de aplicación de muestra de marcado:
- En el lado no brillante de la membrana, marque ligeramente con un lápiz la línea de aplicación de la muestra.
- La ubicación de la línea de aplicación se puede elegir a 2 o 3 cm de un extremo de la membrana o, a veces, cerca de la línea central.
- La posición de la línea de aplicación generalmente se determina basándose en experimentos preliminares de electroforesis.
Inmersión en solución tampón de electrodo:
- En un plato poco profundo o en un plato de cultivo, vierta la solución tampón para electrodos.
- Con cuidado, haga flotar la membrana sobre la superficie de la solución tampón del electrodo, asegurándose de que el lado no brillante mire hacia abajo.
- A medida que la parte inferior de la membrana absorbe la solución tampón del electrodo, se hunde gradualmente hasta quedar completamente sumergida.
Eliminar y absorber el exceso de líquido:
- Después de que la membrana haya impregnado la solución tampón del electrodo, utilice unas pinzas romas para retirarla con cuidado.
- Coloque la membrana entre dos capas de papel de filtro para absorber el exceso de solución tampón de electrodo, evitando la sequedad excesiva.
- Si aparece un área blanca opaca en la membrana, lo que indica un secado excesivo, vuelva a sumergir la membrana en una solución tampón de electrodo y absorba en el grado apropiado con papel de filtro.
Proceso de solicitud de muestra
Elegir y operar en una línea de aplicación de muestra:
Aplique la muestra a lo largo de la línea de aplicación de la muestra en el lado no brillante de la membrana, generalmente en un patrón lineal en lugar de una aplicación puntual.
Aplicación de muestra de análisis cualitativo:
- Utilice tubos capilares (con un diámetro de 0,5 a 1,0 mm) o moldes para la aplicación de muestras de análisis cualitativo.
- Durante el análisis cualitativo, sumerja la muestra y “séllela” a lo largo de la línea de aplicación de la muestra.
Aplicación de muestra de análisis cuantitativo:
- Utilice una jeringa de microlitros para la aplicación de muestras de análisis cuantitativo.
- Cuando utilice un tubo capilar o una jeringa de microlitros, muévalo suavemente hacia arriba y hacia abajo o hacia la izquierda y hacia la derecha a lo largo de la línea de aplicación de la muestra hasta que se aplique el volumen predeterminado de la muestra.
Control de las dimensiones de la línea de muestreo:
- Después de aplicar cada muestra sobre la membrana, la longitud de la línea de muestra es generalmente de 1,5 cm, con un ancho que generalmente no excede los 4 mm.
- La distancia entre las líneas de muestra y entre la línea de muestra y el borde largo de la membrana es generalmente de 3 a 5 mm.
Ajustar el volumen de la muestra:
La cantidad o volumen de la muestra aplicada varía significativamente dependiendo de factores como la concentración de la muestra, la tinción y los métodos analíticos.
Volumen de muestra durante el análisis cuantitativo:
Para el análisis cuantitativo, el volumen de muestra aplicado en cada centímetro de la línea de aplicación de muestra es generalmente de 0,1 a 0,5 μl, equivalente a la cantidad de una muestra de proteína de 5 a 1000 μg.
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Hora de publicación: 30 de enero de 2024